Süt Dişi Kaynaklı Mezenkimal Kök Hücrelerin Farklı Tekniklerle Kriyoprezervasyonu

Tolga Akkoç; Deniz Genç; Tunç Akkoç

doi:10.4274/jarem.galenos.2023.63497

Süt Dişi Kaynaklı Mezenkimal Kök Hücrelerin Farklı Tekniklerle Kriyoprezervasyonu

PDF

Orijinal Araştırma

Süt Dişi Kaynaklı Mezenkimal Kök Hücrelerin Farklı Tekniklerle Kriyoprezervasyonu

J Acad Res Med 2023;13(1):16-22 DOI: 10.4274/jarem.galenos.2023.63497

, ,

PDF

İzin

Öz

Amaç:

Mezenkimal kök hücreler (MKH’ler) deneysel ve klinik çalışmalarda izolasyonlarından hemen sonra kullanılmamaktadır. Geleneksel dondurma ve çözme işlemleri, MKH’lerin hücre canlılığını veya immünolojik özelliklerini etkileyebilir. Bu çalışmada, farklı dondurma yöntemlerinin insan dökülen süt dişi (SHED) kaynaklı MKH'nin canlılık, farklılaşma potansiyeli ve immünolojik özellikleri üzerine etkisi araştırılmıştır.

Yöntemler:

SHED kaynaklı MKH'ler, 8-12 yaş arası sağlıklı deneklerin SHED’lerinden izole edilmiştir. Üçüncü pasaja gelen hücreleri, farklı konsantrasyonlarda dimetil sülfoksit, trehaloz, etilen glikol veya PVP40 içeren üç farklı dondurma solüsyonu ile donduruldu. Çözdürüldükten sonra hücreler, hücre canlılığı açısından analiz edildi ve mononükleer hücrelerle birlikte kültür edildi ve lenfosit çoğalma hızı ve immünolojik özelliklerin değerlendirilmesi için hücre canlılığı açısından analiz edildi.

Bulgular:

Trehaloz ve etilen glikol içeren kriyoprotektan solüsyonlarıyla gerçekleştirilen dondurma yöntemleri konvansiyonel hücre dondurma yöntemlerine göre lenfosit proliferasyonu baskılanmış, hücre canlılığı oranları artmıştır (p<0,05).

Sonuç:

Trehaloz, etilen glikol veya PVP40 içeren kriyoprotektan solüsyonlar hücre dondurma işlemi için daha uygundur.

Anahtar Kelimeler: Mezenkimal kök hücreler, kriyoprezervasyon, kriyoprotektan ajanlar

Kaynakça

1

Sarugaser R, Hanoun L, Keating A, Stanford WL, Davies JE. Human mesenchymal stem cells self-renew and differentiate according to a deterministic hierarchy. PLoS One 2009; 4: e6498.

2

Wang L, Zhao Y, Shi S. Interplay between mesenchymal stem cells and lymphocytes: implications for immunotherapy and tissue regeneration. J Dent Res 2012; 91: 1003-10.

3

Huang GT, Gronthos S, Shi S. Mesenchymal stem cells derived from dental tissues vs. those from other sources: their biology and role in regenerative medicine. J Dent Res 2009; 88: 792-806.

4

Laffey MK, Kubelick KP, Donnelly EM, Emelianov SY. Effects of Freezing on Mesenchymal Stem Cells Labeled with Gold Nanoparticles. Tissue Eng Part C Methods 2020; 26: 1-10.

5

Yong KW, Wan Safwani WK, Xu F, Wan Abas WA, Choi JR, Pingguan-Murphy B. Cryopreservation of Human Mesenchymal Stem Cells for Clinical Applications: Current Methods and Challenges. Biopreserv Biobank 2015; 13: 231-9.

6

Wong KM, van Wely M, Verhoeve HR, Kaaijk EM, Mol F, van der Veen F, et al. Transfer of fresh or frozen embryos: a randomised controlled trial. Hum Reprod 2021; 36: 998-1006.

7

Yildirim S, Zibandeh N, Genc D, Ozcan EM, Goker K, Akkoc T. The Comparison of the Immunologic Properties of Stem Cells Isolated from Human Exfoliated Deciduous Teeth, Dental Pulp, and Dental Follicles. Stem Cells Int 2016; 2016: 4682875.

8

Hornberger K, Yu G, McKenna D, Hubel A. Cryopreservation of Hematopoietic Stem Cells: Emerging Assays, Cryoprotectant Agents, and Technology to Improve Outcomes. Transfus Med Hemother 2019; 46: 188-96.

9

Hunt CJ. Cryopreservation of Human Stem Cells for Clinical Application: A Review. Transfus Med Hemother 2011; 38: 107-23.

10

Linkova DD, Rubtsova YP, Egorikhina MN. Cryostorage of Mesenchymal Stem Cells and Biomedical Cell-Based Products. Cells 2022; 11: 2691.

11

Lindemann D, Werle SB, Steffens D, Garcia-Godoy F, Pranke P, Casagrande L. Effects of cryopreservation on the characteristics of dental pulp stem cells of intact deciduous teeth. Arch Oral Biol 2014; 59: 970-6.

12

Iwatani M, Ikegami K, Kremenska Y, Hattori N, Tanaka S, Yagi S, et al. Dimethyl sulfoxide has an impact on epigenetic profile in mouse embryoid body. Stem Cells 2006; 24: 2549-56.

13

Berz D, McCormack EM, Winer ES, Colvin GA, Quesenberry PJ. Cryopreservation of hematopoietic stem cells. Am J Hematol 2007; 82: 463-72.

14

Campbell LH, Brockbank KG. Serum-free solutions for cryopreservation of cells. In Vitro Cell Dev Biol Anim 2007; 43: 269-75.

15

Thirumala S, Wu X, Gimble JM, Devireddy RV. Evaluation of polyvinylpyrrolidone as a cryoprotectant for adipose tissue-derived adult stem cells. Tissue Eng Part C Methods 2010; 16: 783-92.

16

Thirumala S, Gimble JM, Devireddy RV. Cryopreservation of stromal vascular fraction of adipose tissue in a serum-free freezing medium. J Tissue Eng Regen Med 2010; 4: 224-32.

17

Liu G, Zhou H, Li Y, Li G, Cui L, Liu W, et al. Evaluation of the viability and osteogenic differentiation of cryopreserved human adipose-derived stem cells. Cryobiology 2008; 57: 18-24.